在依利特色譜柱實驗過程中經(jīng)常遇到的情況：

　　(1) 新的色譜柱，直接上分析條件來分析樣品，發(fā)現(xiàn)分離情況不穩(wěn)定。

　　(2) 新的色譜柱，使用中發(fā)現(xiàn)壓力突然升高。

　　(3) 新的色譜柱，發(fā)現(xiàn)分離度、保留時間發(fā)生了變化。

　　(4) 色譜柱使用不頻繁，一開始分析樣品效果比較好，但是，在使用過程中發(fā)現(xiàn)柱效下降快、峰形異常的情況。

　　(5) 色譜峰形異常，基線不穩(wěn)。

　　當發(fā)生以上情況，請仔細檢查，是否有某個操作疏忽了？

　　1）測試柱性能

　　通常情況下，我們建議用戶在拿到色譜柱后，件事情就是在一臺性能完好的儀器系統(tǒng)上，按照廠家說明書對色譜柱進行柱效測試。其實，對于一個合格的色譜分析工作者來說，拿到一根新色譜柱，要開始一個課題之前，都會這樣做，目的有二：1、了解色譜柱之前的情況并判斷色譜柱是否正常。2、將檢測結果小心保存， 當實驗過程中發(fā)現(xiàn)異常時，在檢測柱效進行對比，來進一步排查原因。

　　2）當反相使用高濃度緩沖鹽時，注意過渡

　　在使用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑時，一定要注意應先用10％左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出，造成系統(tǒng)堵塞。另外，在發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)壓力升高異常時，要仔細檢查，段段排除包括保護柱、混合器、管路或者流通池等。

　　3）當更換色譜柱時，原來的實驗情況發(fā)生變化

　　首先，如果之前開發(fā)方法時色譜柱已經(jīng)做過別的樣品，那么之前的樣品或使用的流動相對這個樣品分析可能有干擾，只能重新找條件。建議：開發(fā)方法時使用新的色譜柱。（其次，如果是更換了品牌發(fā)生這樣的情況，可能是由于不同品牌的鍵合技術不同，造成了選擇性的細微差異 ，需要調整條件，并再次確定出峰順序（有些樣品的洗脫順序會改變）。再次，如果是更換了同品牌型號的新的色譜柱發(fā)生這種情況，請檢查之前分離時目標與雜質的分離度是否符合要求（Rs大于1.5），如果一開始只是勉強分開（Rs小于1.5），那只能說明方法沒有優(yōu)化好，需要再次進行優(yōu)化。

　　4）樣品及前處理

　　樣品要盡可能清潔，可選用樣品過濾器或樣品預處理柱（SPE）對樣品進行預處理；若樣品不便處理，要使用保護柱。流動相中所使用的各種有機溶劑要使用色譜純，配流動相的水應該是超純水或雙蒸水。如果將所配得流動相再經(jīng)過0.45μm的濾膜過濾一次則更好，尤其是含鹽的流動相。另外，裝流動相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線過濾器等裝置應該定期清洗或更換。

　　5）色譜柱基線問題

　　通常情況，基線問題是由于系統(tǒng)或者流動相引起的，和色譜柱關系不大。